کتاب تشخیص مولکولی بالینی اختلالات نشر آریا دانش

کل ژنوم انسان حدود ۲۰۰۰۰ ژن را رمزگذاری می کند. کل اگزوم هدف فقط حدود ۱-۲٪ از کل ژنوم است. برای پانل‌های NGS، توالی هدف کل معمولاً بیش از ۱ مگابایت نیست و تعداد ژن‌های هدف حدود ۵-۵۰۰ است. بنابراین، مناطق ژنومی مورد علاقه در پانل های NGS تنها بخش کوچکی از کل ژنوم است. این کسر کوچک هدف باید قبل از تجزیه و تحلیل NGS غنی شود. معمولاً از دو روش اصلی برای غنی سازی توالی هدف استفاده می شود. تکثیر اختصاصی ژن مبتنی بر PCR و هیبریداسیون مبتنی بر جذب به کتابخانه ای از پروب ها در مناطق هدف انجام می شود. صرف نظر از روش غنی‌سازی، الگوهای DNA به اندازه ی مناسب تکه تکه می‌شوند و به آداپتورهایی که حاوی پرایمرهای تعیین توالی‌ رایج و شاخص‌های نمونه برای آنالیز توالی بعدی هستند، متصل می‌شوند.